<del id="rrr9r"></del>
                      <pre id="rrr9r"></pre><ruby id="rrr9r"><mark id="rrr9r"><progress id="rrr9r"></progress></mark></ruby>

                      <pre id="rrr9r"></pre>

                      <pre id="rrr9r"><ruby id="rrr9r"></ruby></pre>

                        <pre id="rrr9r"><del id="rrr9r"><thead id="rrr9r"></thead></del></pre>
                          歡迎來到上海安為生物科技有限公司網站!
                          咨詢熱線

                          18516249105

                          當前位置:首頁  >  技術文章  >  小鼠成纖維細胞組織塊的培養方法說明

                          小鼠成纖維細胞組織塊的培養方法說明

                          更新時間:2022-08-23  |  點擊率:1628
                            成纖維細胞是疏松結締組織中最常見而且數量較多的一種細胞,位于膠原纖維近旁并依附于其上。此細胞的形態結構可隨其功能狀態的不同而改變。在功能活動旺盛時,成纖維細胞的胞體較大,呈扁平星形,有突起。胞核呈卵圓形,核染色質較少,著色淺,核仁明顯。胞質較多,弱鹼性,內含豐富的粗面內質網、核蛋白體、高爾基復合體以及微絲和微管等結構,表明此種細胞具有合成和分泌膠原蛋白、彈性蛋白和多糖蛋白,形成膠原纖維、彈性纖維、網狀纖維和基質的作用。在相對靜止或功能活動不活躍時的細胞,稱為纖維細胞。這種細胞比成纖維細胞小,輪廓不甚清楚,多呈梭形。胞質少,弱嗜酸性,其中粗面內質網、高爾基復合體及其它細胞器均不發達。這表明纖維細胞是功能活動不活躍的細胞。但在一定條件下,如創傷修復,結締組織再生時,纖維細胞可轉化為功能活躍的成纖維細胞,積極參與合成和分泌蛋白質,形成纖維和基質。簡便快速分離培養成纖維細胞對是否能在體外成功建立模擬腫瘤微環境具有重要意義。
                          小鼠成纖維細胞組織塊培養法:
                            1)小鼠成纖維細胞組織塊培養法在已有文獻基礎上優化進行。將剛出生的小鼠處死,75%酒精浸泡消毒后,放入生物安全柜內進行操作。先取其背部皮膚,放入75%酒精中浸泡消毒,以無Ca2+、Mg2+PBS漂洗皮膚。其次,將皮膚剪成1mm2大小,均勻平貼于無菌平皿中,加入適量DEME*培養基,37℃、5%CO2培養24h,使皮膚能夠牢固平貼于平皿上。24h后再加入足量的培養基37℃、5%CO2培養,1周后將組織塊去除,即可見成纖維細胞生長(在這1周內除了中間換1次培養基,盡量勿動培養平皿)。此后,每2天換1次培養液,8~10d后可見細胞鋪滿皿底,消化傳代。
                            2)成纖維細胞傳代
                            當去組織塊后的成纖維細胞在培養平皿中長成片可傳代時,吸去舊培養液,用無Ca2+、Mg2+PBS漂洗1次,加入0.05%胰蛋白酶,覆蓋皿底細胞,在室溫下輕輕吹打。將平皿在倒置顯微鏡下觀察,消化5min左右后,發現成纖維細胞變圓時,立即加入等體積的DEME*培養基終止胰酶反應,用吸管輕輕吹打,吹打結束后,將細胞懸液移入離心管,1200r/min離心8min,棄上清液后加入DEME*培養液,吹散混勻按1∶2濃度傳代,以后每2~3天傳代1次。
                          亚洲高清色_亚洲欧美韩国综合色_黄色a级国产免费大片_精品国产v无码大片在线看

                                            <del id="rrr9r"></del>
                                              <pre id="rrr9r"></pre><ruby id="rrr9r"><mark id="rrr9r"><progress id="rrr9r"></progress></mark></ruby>

                                              <pre id="rrr9r"></pre>

                                              <pre id="rrr9r"><ruby id="rrr9r"></ruby></pre>

                                                <pre id="rrr9r"><del id="rrr9r"><thead id="rrr9r"></thead></del></pre>