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                          當前位置:首頁  >  技術文章  >  介紹小鼠成纖維細胞的傳代流程

                          介紹小鼠成纖維細胞的傳代流程

                          更新時間:2022-09-19  |  點擊率:1331
                            小鼠成纖維細胞分離自小鼠皮膚組織的貼壁細胞,成纖維細胞是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞(mesenchymalcell)分化而來。功能活躍的細胞稱為成纖維細胞。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。纖維細胞(fibrocyte),結締組織中數目最多的細胞,相對靜止的細胞稱纖維細胞。
                            成纖維細胞數目最多,胞體大,為多突的紡錘形或星形的扁平細胞,細胞核呈規則的卵圓形,細胞輪廓不清,具有突起。其形態尚可依細胞的功能變化及其附著處的物理性狀不同而發生改變。纖維細胞較小,呈多角形,胞質較少,弱嗜酸性,胞核亦較小,染色較深,電鏡下粗面內質網較少,高爾基復合體不發達。
                            小鼠成纖維細胞傳代流程:
                            1.吸出原培養瓶中的培養基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加1~2ml0.25%EDTA的胰酶消化(注意把握消化時間,通??刂圃?~2min)。
                            2.鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁運動時(不建議消化到細胞漂?。┤サ粢让?,加6~8ml*培養基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落、吹散。
                            3.取出部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中,添加適當的*培養基,于培養箱中培養。
                            4.注意培養基PH值變化情況,定期換液,待細胞密度達到70-80%時重復傳代操作或者凍存。
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