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                          當前位置:首頁  >  產品中心  >  細胞系/細胞株  >  鼠源細胞系  >  AW-hum-308人單核細胞白血病細胞THP-1

                          人單核細胞白血病細胞THP-1

                          簡要描述:人單核細胞白血病細胞THP-1 STR鑒定
                          從 1978 年復發的急性單核細胞白血病 (AML) 的 1 歲男孩的外周血中建立。該細胞可以吞噬乳汁珠和激活的紅細胞,無表面和胞質免疫球蛋白??梢杂梅鸩ù?TPA誘導單核細胞分化。

                          • 產品型號:AW-hum-308
                          • 廠商性質:生產廠家
                          • 更新時間:2023-08-16
                          • 訪  問  量: 2226

                          詳細介紹

                          品牌安為應用領域醫療衛生,生物產業

                          人單核細胞白血病細胞THP-1 STR鑒定

                          人單核細胞白血病細胞THP-1    

                          【THP1; O-THP-1; Tohoku Hospital Pediatrics-1】

                          l 細胞鑒定

                          STR鑒定已通過

                          l 細胞來源

                          國家資源庫

                          l 細胞背景

                          從 1978 年復發的急性單核細胞白血病 (AML) 的 1 歲男孩的外周血中建立。該細胞可以吞噬乳汁珠和激活的紅細胞,無表面和胞質免疫球蛋白??梢杂梅鸩ù?TPA誘導單核細胞分化。

                          注意:NRAS 突變在 PubMed= 9379676 中被錯誤地指示為p.Gly12Ser。

                          l 細胞特性

                           

                          1) 來源:急性單核細胞白血病,單核細胞

                          2) 形態:單核細胞,懸浮

                          3) 含量:>1x106 細胞數

                          4) 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

                          5)  用途:僅供科研使用

                          l 培養條件

                          1) 準備RPMI-1640(推薦awcell-0002)培養基;優質胎牛血清,10%;0.05 mM β-qiu基乙醇(細胞培養級 推薦:awcell-8211);雙抗,1%。

                          2) 參考傳代比例:傳代時控制細胞密度在2-4 ×105cell / mL,并在細胞生長至8-10 ×105cell / mL時進行傳代。

                          3) 參考換液頻率:傳代時換液。

                          4) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。

                          5) 凍存液:*培養液95%,DMSO 5%(使用該凍存液后,按照我庫的經驗復蘇存活率約50%,復蘇后需要額外培養7-10天才能恢復生長)

                          l 注意事項

                           

                          【注意事項】:

                          該細胞為懸浮細胞,根據培養經驗以及客戶的反饋,傳代時使用【半換液法】對細胞狀態較為有利,因此我庫建議您使用【半換液法】進行傳代。

                          1. 您在收到我們提供的用15ml離心管發貨的細胞后,請不要通過離心的方式收集細胞,可以先準備兩個新的T25培養瓶,然后將細胞混合均勻后移入兩個新的T25培養瓶中,補加培養基到10ml。放入到37℃培養箱中。

                          2. 您在收到的是用T25培養瓶發貨的細胞,請先通過離心的方式收集細胞,然后將細胞重懸加入12ml按照說明書要求配置的*培養基吹打均勻后移入兩個新的T25培養瓶中培養即可。

                          3. thp-1懸浮細胞。該細胞在培養時更喜歡溫和處理,培養時盡量少對細胞進行離心處理以此造成對細胞的傷害。換液時不要全培養基更換,建議您使用【半換液法】進行傳代,添加細胞培養基以稀釋細胞至維持密度即可。

                          4. 細胞對血清質量較為敏感,我庫建議您使用進口品牌優質血清進行培養。FBS不要滅活,如果細胞生長緩慢請嘗試使用其他FBS或暫時將FBS濃度增加到20%

                          5.該細胞的培養液中需添加β-qiu基乙醇(細胞培養級別),若不添加,可能會對細胞狀態造成影響。

                          β-qiu基乙醇的穩定性有限,不可將β-qiu基乙醇添加到*培養基中長期儲存,在每次傳代或液體添加時再添加β-巰基乙醇。

                          β-qiu基乙醇(2-qiu基乙醇)被添加到淋巴細胞或其他細胞培養物中,因為在培養基中使用的FBS中氨基酸半胱氨酸供不應求,而胱氨酸則很多。有些細胞(例如T細胞)無法將半胱氨酸轉運到細胞質中,必須將其轉化為半胱氨酸。β-qiu基乙醇將胱氨酸還原為可被細胞轉運的形式,然后轉化為細胞生長所需的半胱氨酸。  β-qiu基乙醇還是一種還原劑,可以分解培養中細胞產生的許多有毒代謝產物,從而改善細胞周圍的環境。

                          6.該細胞對細胞密度較為敏感,培養、傳代時請注意保持細胞密度在合適的范圍(具體請參考細胞說明書)。

                          7..該細胞凍存后復蘇率較低,凍存時請酌情提高細胞量

                          8.通常情況下可以通過向正在生長的細胞中添加*培養基來維持細胞的生長,每7天可以將細胞離心并重懸于新配的培養基中,來完成細胞的全換液。

                          ATCC有關thp-1細胞保持細胞活力的說明

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                          (頻繁的細胞計數是監測thp-1的最佳方法。這些細胞應該每2至3天通過向燒瓶中簡單加入少量新鮮培養基(使它們具有條件培養基)來培養。您不需要每次都離心細胞并重新傳代。當在我們的實驗室中培養時,到第2天,細胞通??梢詳U增到具有更多培養基的更大的燒瓶中。當細胞密度達到8×10 5個活細胞/ ml時需要進行傳代。不允許細胞密度超過1×10(6)活細胞/ ml。)

                          1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

                          2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10?S的培養基來終止消化。

                          3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養基以保持細胞的生長活力,后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

                          3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。

                          4)運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養瓶1:2傳代 。

                          l 運輸形式

                          低溫:(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。

                          常溫: (2) T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。

                          l 生物安全

                          1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

                          2. 建議在復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意:凍存管浸沒在液氮中會泄漏,并會慢慢充滿液氮。解凍時,液氮轉化成氣相可能導致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子,從而產生飛揚的碎屑造成人員傷害。

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