小鼠原代星形膠質細胞的特性及處理方法

　　小鼠原代星形膠質細胞是膠質細胞中體積大的一種。用經典的金屬浸鍍技術（銀染色）顯示此類膠質細胞呈星形，從胞體發出許多長而分支的突起，伸展充填在神經細胞的胞體及其突起之間，起支持和分隔神經細胞的作用。

　　纖維性星形膠質細胞多分布在腦脊髓的皮質，突起細長，分支較少，胞質中含，多分布在灰質，細胞突起粗短，分支多。胞質內膠質絲較少，又稱苔狀細胞。電鏡下星形膠質細胞的胞核有缺失，胞質較清亮，游離核糖核蛋白體和粗面內質網均很少，糖原顆粒豐富，有大量的膠質絲。纖維形星形膠質細胞的突起呈長圓柱形，而原漿性星形膠質細胞的突起呈薄片狀，并常包裹著神經細胞及其突觸。星形膠質細胞的腳板與血管內皮細胞之間相隔一層基板，腳板質膜與基板接觸處有半橋粒結構。

　　小鼠原代星形膠質細胞的特性：

　　1、組織來源于實驗動物的正常腦組織。

　　2、細胞鑒定：神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)免疫熒光染色法。

　　3、經鑒定細胞純度高于90%。

　　4、不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。

　　5、細胞生長方式：星狀細胞，貼壁培養。

　　細胞處理：

　　1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養基，培養過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。

　　2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

　　3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。